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大腸菌群的測定方法!

一、大腸菌群的定義
大腸菌群系指一群能發(fā)酵乳糖、產酸產氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。大腸菌群不是細菌學上的分類命名,而是根據(jù)衛(wèi)生學方面的要求,提出的與糞便污染有關的細菌,即作為食品、水體等是否受過人畜糞便污染的指示菌,這些細菌在生化及血清學方面并非完全一致。根據(jù)進一步的生化試驗,可將這群細菌再分為大腸艾希氏菌(俗稱大腸桿菌)、弗氏檸檬酸桿菌、肺炎克雷伯氏菌和陰溝腸桿菌等。  
二、大腸菌群測定——MPN法檢驗幾點說明 
MPN檢索表: 
MPN 為最大可能數(shù)(Most Probable Number)的簡稱。這種方法,對樣品進行連續(xù)系列稀釋,加入培養(yǎng)基進行培養(yǎng),從規(guī)定的反應呈陽性管數(shù)的出現(xiàn)率,用概率論來推算樣品中菌數(shù)最近似的數(shù)值。MPN檢索表只給了三個稀釋度,如改用不同的稀釋度,則表內數(shù)字應相應降低或增加10倍。 
初發(fā)酵和證實試驗:
1、兩步法進行了兩次乳糖發(fā)酵試驗。初發(fā)酵和證實實驗所用培養(yǎng)基不同,但都是為了證實培養(yǎng)物是否符合大腸菌群的定義,即“在37分解乳糖產酸產氣”。 LST中提供了磷酸鹽緩沖體系,氯化鈉可維持滲透壓,月桂基硫酸鈉可抑制非大腸菌群的生長,這個緩沖蛋白胨乳糖肉湯允許“緩慢乳糖發(fā)酵(Slow lactose fermentations)”來促進菌體產氣。BGLB中膽鹽和煌綠可以抑制革蘭氏陽性細菌和除了大腸菌群的很多革蘭氏陰性細菌。
2、初發(fā)酵陽性管,不能肯定就是大腸菌群細菌,經過證實試驗后,有時可能成為陰性。有數(shù)據(jù)表明,食品中大腸菌群檢驗步驟的符合率,初發(fā)酵與證實試驗相差較大。因此,在實際檢測工作中,證實試驗是必需的。
產氣量與倒管:
在乳糖發(fā)酵試驗工作中,經??梢钥吹皆诎l(fā)酵倒管內極微少的氣泡(有時比小米粒還?。?,有時可以遇到在初發(fā)酵時產酸或沿管壁有緩緩上浮的小氣泡。實驗表明,大腸菌群的產氣量,多者可以使發(fā)酵倒管全部充滿氣體,少者可以產生比小米粒還小的氣泡。如果對產酸但未產氣的乳糖發(fā)酵如有疑問時,可以用手輕輕打動試管,如有氣泡沿管壁上浮,即應考慮可能有氣體產生,而應作進一步試驗。
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