產(chǎn)品名稱 |
大鼠支氣管上皮細胞 |
商品貨號 |
MZ-595 |
組織來源 |
SD大鼠(出生3-4周),5-7只 |
規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
生長特性 |
貼壁 |
細胞形態(tài) |
上皮細胞樣 |
培養(yǎng)基 |
M199培養(yǎng)基,含F(xiàn)BS、上皮細胞生長添加劑、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等 |
細胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
細胞傳代步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
細胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。 |
細胞凍存步驟 |
待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
主要功能 |
(1) 支氣管上皮細胞是由纖毛、無纖毛和能分泌黏液的細胞按照從近端到遠端呼吸道 分布的混合細胞群組成。 (2) 上皮細胞能形成物理屏障,有效的防止多種有毒物質(zhì),通過產(chǎn)生和分泌大量化學(xué) 介質(zhì)和細胞因子形成高度復(fù)雜的宿主防御系統(tǒng)。 (3) 上皮細胞由基細胞,杯狀細胞和纖毛細胞三種細胞構(gòu)成,形成了基底柱狀結(jié)構(gòu), 并能清除粘液纖毛。 (4) 支氣管上皮細胞增殖以及其它細胞過程也部分受到EGF 受體信號的調(diào)節(jié)。 |
主要病生理變化 |
(1) 支氣管炎。 (2) 支氣管擴張。 (3) 支氣管癌。 |