產(chǎn)品名稱 |
人食管上皮細胞 |
商品貨號 |
MZ-3551 |
組織來源 |
正常人食管組織 |
規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
生長特性 |
貼壁 |
細胞形態(tài) |
上皮細胞樣 |
培養(yǎng)基 |
M199培養(yǎng)基,含F(xiàn)BS、上皮細胞生長添加劑、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等 建議購買原代食管上皮細胞專用培養(yǎng)基 |
細胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
細胞描述 |
食管是咽和胃之間的消化管,哺乳動物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層、外膜。其中上皮細胞主要在黏膜層,其上皮為較厚的未角化的復(fù)層扁平上皮,耐摩擦,有保護作用。在發(fā)育過程中,食管的上皮細胞增殖,由單層變?yōu)閺?fù)層,使管腔變狹窄,甚至一度閉鎖,以后管腔又重新出現(xiàn)。在食管與胃賁門交界處,復(fù)層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。 食管損傷、從而導(dǎo)致食管長期的慢性炎癥、潰瘍,或慢性刺激,進而食管上皮增生,最后導(dǎo)致癌變。實驗證明,彌漫性或局灶性上皮增生可能是食管癌的癌前期病變。在食管癌的發(fā)生中,上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化( EMT)是上皮細胞來源的惡性腫瘤細胞獲得遷移和侵襲能力的重要生物學(xué)過程,有利于腫瘤轉(zhuǎn)移。細胞鑒定:廣譜角蛋白(PCK)免疫熒光染色為陽性。 |
細胞傳代步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
細胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。 |
細胞凍存步驟 |
待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
主要功能 |
(1) 食管上皮細胞頂端細胞膜和細胞間連接復(fù)合體聯(lián)合在一起產(chǎn)生有效滲透屏障, 防止食管內(nèi)容物滲入。 (2) 食管上皮細胞使表層細胞的基質(zhì)外側(cè)細胞膜和深層細胞的全部細胞膜均不暴露 于食管腔內(nèi)規(guī)律的大幅波動的滲透壓之下。 (3) 食管上皮基底層的細胞可增殖并向食管腔移行。 |
主要病生理變化 |
(1) 反流性食管炎。 (2) 食管狹窄。 (3) 食管癌。 |